SOP文件 | 尿液标本细菌学检验标准操作规程
3.2 标本采集
3.2.1 中段尿标本采集法
女性：先以肥皂水清洗外阴部，再以无菌水冲洗，用无菌纱布擦拭，以手指将阴唇分开排尿，弃去前段尿，留取中段尿5 ~ 7 ml于无菌试管内。
男性：翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，用清水冲洗，留取中段尿。
儿童、婴儿：先以无菌生理盐水棉球洗净其外阴部或外生殖器，将无菌试管或瓶口对准尿道口，以胶布固定于皮肤上，待尿排出后送检。
3.2.2 两侧肾盂尿：由专科医师采集，左右侧标本必须标明，避免混淆而误诊。
3.2.3 膀胱穿刺：此法用于厌氧菌培养。耻骨上皮肤经碘酊消毒后，再以75％酒精擦拭，用无菌注射器作膀胱穿刺，吸取尿液后排去注射器内的空气，针头插于无菌橡皮塞上送检。
3.2.4 尿标本采集应及时送检，2小时内进行接种。
3.3 标本拒收标准
3.3.1 申请单项目与标本不符。
3.3.2 尿标本不是用无菌容器留取。
3.3.3 送标本的时间在采集标本后超过2小时。
3.4 标本保存
采集标本后立即送到实验室，不能及时送检可置于冰箱。
4 试剂、仪器
4.1 革兰染液、氧化酶试剂、3％触酶、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化试剂等。
4.2VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定药敏卡、革兰阳性菌鉴定药敏卡、药敏纸片等，有效期及储存条件参见试剂说明书。
4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO2培养箱等。
5 细菌鉴定和药敏质控
参见《质量管理程序》。
6 检验步骤
接收标本后，立即对标本进行编号、登记。
6.1 涂片检查
6.1.1 一般细菌涂片：以无菌操作吸取尿液5 ~ 10 ml，3000 r／min离心沉淀15分钟，取沉淀物作涂片及革兰染色，镜检，可提示有无细菌及细菌种类。
6.1.2 真菌涂片：取尿液沉淀物放于清洁玻片上，覆以盖玻片，略加压力，制成涂片，用高倍镜检查。如发现发亮的芽生孢子和假菌丝，就可报告“找到酵母样细胞，形似念珠菌”。
6.1.3 结核分枝杆菌：参见《分枝杆菌属检验标准操作规程》。
6.2 一般细菌培养
取中段尿，用定量接种环取尿液10μl接种于血琼脂平板，5％ ~ 10％ CO2，35℃培养18 ~ 24小时，观察有无菌落生长，并进行菌落计数。平板生长菌落数乘以100即每毫升尿液的菌落数。根据菌落特征和涂片、染色结果，选择相应的方法作进一步鉴定。
6.3 特殊菌培养
6.3.1 淋病奈瑟菌培养：选用淋球菌琼脂平板等，放入5％ ~ 10％CO2 环境中培养。
6.3.2 厌氧菌培养：必须用膀胱穿刺尿进行培养，接种厌氧琼脂平板，并在厌氧环境培养。
6.3.3 结核分枝杆菌培养：参见《分枝杆菌属检验标准操作规程》。
7 操作流程
8 结果报告
8.1 尿液细菌培养检查必须报告细菌的种属、菌落计数及药敏结果。
8.2 阳性菌>104 CFU／ml，阴性菌>105 CFU／ml视为有意义的阳性结果报告：报告细菌种名、药敏结果及菌落数。
8.3 阴性结果报告：培养48小时无菌落生长，即为阴性。
8.4 若尿液培养同时有≥3种细菌生长时，可视为污染标本，建议重留送检。
9 注意事项
9.1 尿液标本不可置肉汤中进行增菌培养。
9.2 中段尿标本不可做厌氧菌培养。
9.3 收集尿液过程中，请勿将手伸入容器中，且避免尿液溢出容器，以免污染（以无菌导管技术收集尿液的方法已被淘汰）。
10 临床意义
尿液的细菌学检查（中段尿培养加计数）对于泌尿道感染的诊断有重要价值。正常尿液是无菌的，而外尿道有正常菌群寄生，标本的采集必须无菌操作。另外，细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌。有致病菌或条件致病菌生长，菌落计数>105 CFU／ml，提示感染（膀胱炎、肾盂肾炎、肾或膀胱结核等）。常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、肠球菌等。
11 危急值报告
如查出抗酸杆菌阳性，则应及时向临床报告并作传染病报告。
12 相关文件及记录表格
JYK-***-WSW*** 质量管理程序