SOP文件 | 外周血涂片(瑞氏染色)操作规程

Original 检验君检验星空 2021-12-15

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原理：

正常人周围血中的血细胞主要是指红细胞、白细胞、血小板。其中白细胞至少有五种，分属于三个系统。通常根据其来源，形态和对染色的反应，把它们分为淋巴细胞，大单核细胞和三种粒细胞——即嗜中性，嗜酸性，嗜碱性粒细胞。

目的：外周血细胞检查

染色液：

瑞氏染色液配法：美蓝伊红染料1克，加少量甲醇或甘油在研钵中研磨均匀后倒入1000毫升量筒中，用甲醇冲洗研钵，一并倒入量筒中，最后加甲醇至600毫升，混匀后密闭保存备用。工作量大的单位最好一次大量配制。保存时间越长，染色效果越好。

缓冲液：1%磷酸氢二钠20毫升；1%磷酸二氢钾30毫升，两液混合后加水至1000毫升。此缓冲液PH为6.4-6.8。

方法：

1、取血1小滴，加于玻片一端，再用一端边缘整齐光滑的推片推成一厚度适中的血膜。血膜的厚度可由血滴大小，推片的速度和推片与玻片之间的角度大小来调节。血滴小，推进速度慢，推片角度小，涂片薄；反之，则厚。涂片制成后，用铅笔在血膜一端记上姓名或编号，以免相互搞错。

2、血膜干后，滴加瑞氏染液于血膜上盖满。约一分钟后，滴加相当于染液1.5倍量的缓冲液，将两液吹匀，染10-15分钟。用清水洗玻片，待干。

3、用浸油镜检查血膜上分布不均，大细胞多分布于片之两边和尾部；小细胞则多在中间，故采用曲线式移片方法，以减少误差。

4、分类方法：用浸油镜分别计数100个白细胞中各种白细胞所占的百分率。如发现异常红细胞和白细胞亦应报告。同时观察血小板的数量、存在状态及大小。

参考值：

细胞成人

中性粒细胞：

杆状核 0.01～0.05(1%～5%)

分叶核 0.50～0.70(50%～70%)

嗜酸性粒细胞 0.005～0.05(0.5%～5%)

嗜碱性粒细胞 0～0.01(0%～1%)

淋巴细胞 0.20～0.40(20%～40%)

单核细胞 0.03～0.08(3%～8%)

临床意义：

1、增多

（1）中性粒细胞：急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。

（2）嗜酸性粒细胞：变态反应、寄性虫病、某些血液病、手术后、烧伤等。

（3）嗜碱性粒细胞：慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及铋中毒等。

（4）淋巴细胞：百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻疹、肋腺炎、结核、传染性肝炎等。

（5）单核细胞：结核、伤寒、亚急性感染性必内膜炎、疟疾、黑热病、单核细胞白血病、急性传染病的恢复期等。

2、减少

（1）中性粒细胞：伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再障、粒细胞缺乏等。

（2）嗜酸性粒细胞：伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。

（3）淋巴细胞：多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。

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